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固定底物酶底物法对医疗废水中粪大肠菌群监测的适用性研究

摘要:目的在于比较固定底物酶底物法与多管发酵法用于医疗废水中粪大肠菌群(W热大肠菌群)的检测。使用得酶底物法检测试剂和传统方法检测医疗废水,并对主要影响因素余氯对方法的影响进行探索,比较固定底物酶底物法与多管发酵法用于医疗废水中粪大肠菌群(W热大肠菌群)检测结果的一致性。结果表明,固定底物酶底物法与多管发酵法用于医疗水中粪大肠菌群(耐热大肠菌群}检测结果具有一致性,固定酶底物法可以用作评价医疗废水微生物污染的参考方法。
目前水中粪大肠杆菌群(耐热大肠菌群)检测方法主要有传统的滤膜法及多苷发酵法,并且已经列入环保行业标准方法(Hyr347-2007),此两种传统方法被国内环境监测部门广泛采用,但该方法操作时间久、步骤较为繁琐,并且需验证试验,不能对医疗废水的污染状况做出快速评价,及时性较差,制约了环保部门的监督监测的即时效果和环境应急措施的制定。因此研究并选择一个快速、准确的监测水中粪大肠杆菌群(耐热大肠菌群)的标准方法就具有相当重大的意义。
固定底物酶底物法(Defined Subsrate Technology, DST,以下简称DST-酶底物法)采用大肠菌群细術能产生P-半乳糖苷酶(P-D-gaUctosUlase)分解邻硝基苯P-D-半乳吡喃糖苷0NPG(Ortho-Uropheny-p-D-galaclopyranoside)使培养液呈黄色,以及大肠埃希氏菌产生P-葡萄糖醛酸酶(p-glucimmidase)分解MUG使培养液在波长366nm紫外光下产生荧光的原理,来判断水样中是否含有大肠菌群、粪大肠菌群(耐热大肠菌群)及大肠埃希氏菌。该方法与传统多管发酵法相比具有以下优点:可以采用成品的培养基及试剂,操作方便;密封培养;无二次污染;实验用品易于集中无害化处理;无需确认试验;DST-酶底物法监测时间较短,18〜24h即可同时判断水样中粪大肠菌群(耐热大肠菌群)的MPN值酶底物法。且多管发酵法每升水样中最低检出限为2个粪大肠菌群,而固定底物酶底物法却能抑制200万个异样细菌,精确监测到1个粪大肠菌群,具有更高的监测灵敏性和更宽的监测范围。在美国,欧洲及大部分亚洲国家广泛应用于水质中总大肠杆菌,粪大肠蔺群(耐热大肠菌群)及大肠埃希氏的监测,并通过美国EPA《水与废水标准检测方法以及我国生活饮用水标准检验方法》认证。
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