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立科酶底物法检测大肠菌群操作说明

  立科酶底物法检测系统采用了GB/T5750.12-2006《生活饮用水标准检测方法》中的MMO-MUG特异性培养基的呈色和荧光反应有效的检出大肠菌群细菌组。立科Colitech培养基中特殊的配方基质可以有效的抑制非目标细菌的生物酶干扰检测结果,同时,这些特殊配方基质可以有效促进目标细菌的生物酶和固定物反应,所以该方法比传统的滤膜法和多管法的假阳性和假阴性发生率更低。

立科酶底物检测系统

  选择立科酶底物法检测即可以作定性又可以作定量分析,同时检测两个指标,总大肠菌群(total coli)和大肠埃希氏菌(Escherichia coli),方法简便,快速,结果准确。但是,如果不按照操作说明使用机器,就有可能造成人员伤害、机器损害、其他财产损害以及检测结果不准确。

  操作说明如下:

  1、操作前后或离开实验室时必须用按照标准洗手法对手部进行清洗消毒。

  2、在取水样和取定量检测盘时,手不能碰触到含有少量硫代硫酸钠的无菌取样瓶及定量检测盘的封口处,以免影响检测结果。

  3、取100ml样品加入到取样瓶中,加入酶底物检测试剂时应拧紧盖子,充分摇匀至完全溶解,再加入立科配备的51孔定量检测盘或97孔定量检测盘。

  4、程控定量封口机需要预热直到指示灯亮起(LK-2010型预热时间约30分钟左右,LK-2014A型预热更快,仅需15分钟),只有当指示灯亮起才说明机器达到工作温度,可正常使用。

  5、将橡胶垫放到进口托盘架上,有大矩形孔的一头在外。再把装有样品和Colitech试剂的定量检测盘放入橡胶垫上,注意应使定量检测盘上的凹陷与橡胶垫的凹陷一一对应。

定量检测盘与橡胶垫凹陷一一对应

  6、向机器方向轻轻推动橡胶垫,直到封口机抓住橡胶垫,并带入机器。当定量检测盘封口完成后,将从封口机后部传出,应取出托盘和检测盘。LK-2010型封口速度≤15秒/个,LK-2014A型封口速度≤12秒/个,可按需选择。

  7、若不慎将定量检测盘没放平就将橡胶垫放入封口机时,可选择倒退键,使机器反转,从前方退出橡胶垫。但是,当橡胶垫已经完全进入封口机中,请不要按倒退键。如果有多个橡胶垫,可以连续放入,LK-2014A型独有的数显窗口可对其进行计数展示,封装数量一目了然。

  8、封口后的定量检测盘在36±1℃培养24h,如测定耐热大肠菌群则培养温度变为44.5±0.5摄氏度。

  9、培养完成后在暗室中使用配备的双波长(254nm,366nm)手持紫外分析仪,选择合适波长后在距样品15厘米左右的位置观测是否有荧光。

  10、结果应在24-28小时内读取。此外,总大肠菌群和大肠埃希氏菌培养时间小于24小时已经为阳性;或总大肠菌群和大肠埃希氏菌大于28小时依然为阴性,则结果也有效。

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