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粪大肠菌群酶底物检测法在水质应急监测中的应用

近期,洪涝灾害席卷全国,陕西子洲、甘肃文县、东北3省局地发生洪涝灾害,人民群众生命财产安全受到极大威胁,尤其是饮用水安全问题收到严峻挑战,大量水源都遭到了破坏或污染,因而为灾区群众提供安全的生活饮用水成为迫在眉睫的任务。而当找到新水源时,迅速、准确的报告出水源污染物的情况,关系着群众们的生产生活安全。

 

  粪大肠菌群即俗称的耐热大肠菌群,是水质污染的重要指标之一,也是环境质量标准和排放标准中不可缺少的控制指标之一。快速、准确的检测粪大肠菌群,可以及时的将水体的污染情况反映出来,做好水质污染的应急监测。

 

  目前水质检测标准中常见方法为多管发酵法,可是多管发酵法操作繁琐、对操作环境有一定要求,同时需要48-72h才能获得结果,在水质应急监测中难以满足突发性环境污染事故监测及时、准确的要求。而酶底物法是一种新型的酶技术检测方法,利用大肠菌群在44.5℃生长过程中产生的β-半乳糖苷酶可以分解培养基中的领硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷,使得培养基呈现黄色与荧光反应,根据最终的阳性组合,查阅MPN表而得出粪大肠菌群的数量。

 

  在实际操作的过程中,检测人员根据水质污染的程度选取100ml水样加入到立科Colitech配备的定量瓶中,再向其加入立科Colitech酶底物法检测试剂,拧紧盖子摇匀至完全溶解,然后加入到立科Colitech配备的97孔定量检测盘,经过LK-2014A程控定量封口机密封后,置于培养箱中连续培养24小时,然后根据实际的阳性孔数、通过查MPN表进行计算。

 

以粪大肠菌群检测操作为例,酶底物法仅需加入水样-加入试剂-封口培养,操作十分简单,过程也很便捷,这就降低了人为操作中的可能带来的污染影响。同时,酶底物法使用的立科Colitech配备的97孔定量检测盘所包含的数表能够达到2400组,远大于其他检测方法,结果更准确。而且,由于立科Colitech培养基中特殊配方的基质可抑制干扰反应进程,促进目标细菌的生物酶和固定底物反应,所以假阳性和假阴性的发生率比传统方法更低。

 

 酶底物检测法.jpg

 

  采用酶底物法检测粪大肠菌群时,仅需注意下述几点,即可获得精准结果。

 

  1、样品在加入立科Colitech酶底物法检测试剂后一定要摇匀,使得试剂和水样完全混合,避免因混合不均造成的结果差异性大,从而丧失方法的稳定性优势。

 

  2、当水源水质太差时,一定要确保稀释比的合理性。有研究学者发现,当水样稀释倍数越高时,酶底物法的测定值就越低。因此,在水质的应急监测中,一定要根据实际情况对水样做做小倍数稀释,使得结果更加准确、真实。

 

  3、在对经过LK-2014A程控定量封口机密封后的检测盘在培养时,需保证培养箱中温度恒定,当温度误差大于±0.5℃后,不管温度是偏高还是偏低,都将会直接影响检测结果。

 

  酶底物法相对于其他的粪大肠菌群检测方法操作简单,所得结果也较为准确快速,在水质应急监测中有着广泛的应用前景。目前酶底物法在国内选择较多,立科环保的酶底物法检测系统包括程控定量封口机1台,51/97孔定量检测盘1箱(100/箱),Colitech酶底物法检测试剂1盒(200/盒),100ml带刻度取样瓶1箱(200/箱),紫光检测仪带暗室1台,比色盘1个,配制齐全,是水质应急监测中的必备选择。

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